Cel badania Badanie ma na celu wykrycie materiału genetycznego (RNA) czterech najczęstszych patogenów wywołujących ostre infekcje dróg oddechowych: wirusa syncytialnego (RSV), koronawirusa SARS‑CoV‑2 oraz wirusów grypy typu A i B.
Dzięki zastosowaniu reakcji łańcuchowej reakcji polimerazy z odwrotną transkrypcją (RT‑PCR) możliwe jest jednoczesne oznaczenie wszystkich wymienionych wirusów w jednej analizie, co skraca czas diagnostyczny i ułatwia podejmowanie decyzji terapeutycznych. Wskazania kliniczne Objawy ostrej infekcji górnych i dolnych dróg oddechowych, takie jak gorączka, kaszel, duszność, ból gardła, katar lub osłabienie.
Potrzeba szybkiego rozróżnienia przyczyny infekcji w okresie zwiększonej zachorowalności (sezon grypowy, pandemia COVID‑19, sezon RSV). Monitorowanie rozprzestrzeniania się wirusów w placówkach medycznych, placówkach edukacyjnych oraz wśród osób z podwyższonym ryzykiem powikłań. U pacjentów z autyzmem (ASD), PANS/PANDAS oraz innymi zaburzeniami neurorozwojowymi – infekcje dróg oddechowych mogą nasilać objawy neuro‑inflamacyjne i wymagać szybkiej interwencji.
W sytuacjach, gdy wyniki testów antygenowych są niejednoznaczne lub wymagane jest potwierdzenie laboratoryjne. Metoda Próbka pobierana jest z wymazu nosogardzieli (wymaz nosowy lub wymaz z gardła) przy użyciu sterylnych wymazówek. Następnie: RNA wirusowe jest izolowane z materiału biologicznego przy użyciu specjalistycznych zestawów do ekstrakcji. Izolowane RNA poddawane jest odwrotnej transkrypcji, co prowadzi do syntezy komplementarnego DNA (cDNA).
cDNA jest amplifikowane w reakcji PCR z użyciem zestawu primerów i sond hybrydowych specyficznych dla genów N, E i RdRp wirusa SARS‑CoV‑2 oraz genów M i NP wirusów grypy A i B i genu F wirusa RSV. Detekcja odbywa się w czasie rzeczywistym (qRT‑PCR), co pozwala na określenie obecności i ilościowego szacowania ładunku wirusowego. Czas od pobrania próbki do uzyskania wyniku wynosi zazwyczaj 1–2 godziny, a czułość testu przekracza 95 % przy prawidłowej jakości materiału.
Przygotowanie pacjenta Nie jeść ani nie pić (poza wodą) przez co najmniej 30 minut przed pobraniem wymazu, aby nie zakłócić pobrania materiału. Unikać stosowania kropli do nosa, aerozoli, leków przeciwzapalnych lub antybiotyków w ciągu 12 godzin przed badaniem, gdyż mogą wpływać na ilość dostępnego RNA. W przypadku małych dzieci zapewnić spokojne otoczenie; w razie potrzeby skonsultować się z lekarzem w sprawie ewentualnej sedacji lub zastosowania techniki wymazu pod kontrolą.