Cel badania Test transformacji limfocytów przy użyciu metody ELISPOT (Enzyme‑Linked ImmunoSpot) służy do wykrywania i ilościowego oznaczania komórek T wydzielających interferon‑γ (IFN‑γ) po stymulacji antygenem Mycoplasma pneumoniae. Dzięki temu możliwe jest określenie aktywności komórkowej odpowiedzi immunologicznej na tę bakteryjną patogenę.
Wskazania kliniczne Potwierdzenie aktualnej lub przebytej infekcji Mycoplasma pneumoniae, zwłaszcza gdy wyniki serologii są niejednoznaczne. pneumoniae w wywoływaniu lub nasilaniu zaburzeń neurorozwojowych, takich jak autyzm (ASD), zespół PANS/PANDAS oraz inne zaburzenia neuropsychiatryczne. Monitorowanie odpowiedzi immunologicznej po leczeniu antybiotykowym. Badania naukowe nad mechanizmami autoimmunologicznymi i immunomodulacyjnymi w chorobach współistniejących z infekcją M.
Materiał biologiczny Do testu wymagana jest krew pełna pobrana w probówce z antykoagulantem CPDA (citrate‑phosphate‑dextrose‑adenine). Przygotowanie pacjenta Nie jest wymagane specjalne przygotowanie dietetyczne. Próbkę należy pobrać w warunkach aseptycznych, najlepiej w ciągu 24 h od wystąpienia objawów lub w momencie podejrzenia aktywnej infekcji. Próbka powinna być transportowana w temperaturze 2‑8 °C i przetwarzana w laboratorium nie później niż 6 h od pobrania.
Metoda ELISPOT polega na inkubacji izolowanych limfocytów z antygenem M. pneumoniae na specjalnych płytkach pokrytych przeciwciałami wychwytującymi IFN‑γ. Po określonym czasie (zwykle 18‑24 h) wydzielone cytokiny są wykrywane za pomocą drugiego przeciwciała sprzężonego z enzymem, co prowadzi do powstania widocznych plam (spotów). Każdy spot odpowiada jednej komórce wydzielającej IFN‑γ.
Liczba spotów jest automatycznie liczona i wyrażana jako liczba komórek reagujących na 10⁵ komórek całkowitych. Interpretacja wyników Wynik dodatni – zwiększona liczba spotów (zwykle > 50 spotów/10⁵ komórek) wskazuje na aktywną komórkową odpowiedź immunologiczną przeciwko M.
Wynik negatywny – liczba spotów w granicach wartości referencyjnych ( Wynik nieokreślony – liczby spotów pomiędzy 20‑50 spotów/10⁵ komórek wymagają korelacji z wynikami serologicznymi, klinicznymi oraz ewentualnym powtórzeniem badania. W kontekście zaburzeń neurorozwojowych podwyższona odpowiedź komórkowa może sugerować mechanizm immunologiczny (np. autoimmunologiczny) wpływający na objawy neurologiczne.