Cel badania Test transformacji limfocytów – HSV ½ metodą ELISpot ma na celu ilościową ocenę liczby limfocytów T, które po zetknięciu z antygenem wirusa opryszczki (HSV) wydzielają interferon‑γ (IFN‑γ). Dzięki temu można określić stopień aktywacji komórek odpornościowych przeciwko HSV oraz ich zdolność do przeprowadzania odpowiedzi immunologicznej. Wskazania kliniczne Diagnostyka i monitorowanie infekcji HSV, w tym zakażeń pierwotnych i nawrotów.
Ocena funkcji komórkowej odporności u pacjentów z zaburzeniami neurorozwojowymi (ASD, PANS/PANDAS), u których zakażenie HSV może wpływać na przebieg choroby. Wspomaganie decyzji terapeutycznych w przypadkach podejrzenia niewydolności immunologicznej lub potrzeby intensywnej immunomodulacji. Badania naukowe nad wpływem wirusa HSV na układ nerwowy i rozwój neuropsychiatryczny.
Materiał biologiczny Pełna krew pobrana do probówki z antykoagulantem CPDA (citrate‑phosphate‑dextrose‑adenine). Próbka powinna zostać przetworzona w ciągu 24 h od pobrania, aby zapewnić żywotność limfocytów. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnego przygotowania. Zaleca się unikanie intensywnej aktywności fizycznej oraz przyjmowania leków immunosupresyjnych w dniu pobrania, jeśli to możliwe, aby nie zafałszować wyniku.
Metoda Test opiera się na technice ELISpot (Enzyme‑Linked ImmunoSpot). Procedura obejmuje: Izolację limfocytów mononuklearnych (PBMC) z pełnej krwi. Inkubację komórek w płytkach pokrytych przeciwciałami przeciw IFN‑γ oraz w obecności antygenu HSV (zazwyczaj peptydów pochodzących z białka gB lub ICP27). Wytworzenie wysp (spotów) w miejscu, gdzie aktywowane limfocyty wydzielają IFN‑γ.
Detekcję i liczbę spotów przy użyciu specjalistycznego czytnika ELISpot, co odpowiada liczbie komórek reagujących na HSV w 10⁶ PBMC. Interpretacja wyników Wynik podawany jest jako liczba spotów na 10⁶ limfocytów. Typowe zakresy interpretacyjne: 0‑5 spotów/10⁶ PBMC – brak wykrywalnej odpowiedzi komórkowej na HSV. 6‑30 spotów/10⁶ PBMC – niska do umiarkowanej odpowiedź, może wskazywać na przeszłą ekspozycję lub łagodny przebieg infekcji.
>30 spotów/10⁶ PBMC – silna odpowiedź, sugerująca aktywną lub niedawno przebyta infekcję HSV. Wartości należy interpretować w kontekście klinicznym, historii choroby oraz innych badań (np. Ograniczenia Test ocenia jedynie odpowiedź na wybrany antygen HSV; nie wyklucza innych wirusów opryszczki (np. Wynik może być obniżony u pacjentów przyjmujących silne immunosupresanty lub po chemioterapii.