Cel badania Badanie ma na celu wykrycie i ilościowe określenie limfocytów T, które po ekspozycji na antygen Borrelia miyamotoi wydzielają interferon‑γ. Dzięki temu możliwe jest stwierdzenie, czy w organizmie pacjenta zachodzi aktualna odpowiedź immunologiczna na infekcję wywołaną przez tę bakterię. Wskazania kliniczne Podejrzenie infekcji Borrelia miyamotoi (gorączka przerywana, bóle stawów, objawy neurologiczne) – ICD‑10 A68.1.
Ocena aktywności choroby u pacjentów z potwierdzonym zakażeniem, w tym w kontekście zaburzeń neurorozwojowych, gdzie infekcje mogą wpływać na przebieg objawów ASD, PANS/PANDAS. Monitorowanie skuteczności leczenia antybiotykowego oraz ocena ryzyka nawrotu. Wspomaganie diagnostyki różnicowej w przypadkach objawów podobnych do boreliozy, ale z negatywnym wynikiem testów serologicznych. Metoda Test oparty jest na technice ELISpot (Enzyme‑Linked ImmunoSpot).
Procedura polega na: Izolacji komórek mononuklearnych (PBMC) z pełnej krwi pobranej do probówki z antykoagulantem CPDA. Inkubacji komórek w płytkach pokrytych antygenem Borrelia miyamotoi. Wykryciu wydzielanego interferonu‑γ przy użyciu przeciwciał znakowanych enzymem, co prowadzi do powstania widocznych plam (spotów) oznaczających pojedyncze komórki produkujące cytokiny. Analizy liczby spotów przy pomocy automatycznego czytnika, co pozwala na kwantyfikację reakcji T‑komórek.
Przygotowanie pacjenta Próbka krwi powinna być pobrana w warunkach sterylnych, najlepiej rano, po co najmniej 8‑godzinnym okresie postu, aby uniknąć wpływu posiłku na liczbę limfocytów. Krew pobiera się do probówek zawierających CPDA (citrate‑phosphate‑dextrose‑adenine) i niezwłocznie przekazuje do działu CS, który przygotuje i wyizoluje PBMC. Unika się jednoczesnego podawania leków immunosupresyjnych lub kortykosteroidów, które mogą zafałszować wynik.
Interpretacja wyników Wzmożona odpowiedź ELISpot (liczba spotów wyższa niż ustalony próg referencyjny) wskazuje na aktywną infekcję Borrelia miyamotoi lub niedawne narażenie. Brak reakcji (liczba spotów w granicach normy) może oznaczać brak aktualnej infekcji, wczesny etap zakażenia przed rozwinięciem odpowiedzi komórkowej lub skuteczne zahamowanie patogenów leczeniem.
Wynik należy interpretować w kontekście historii choroby, wyników badań serologicznych i klinicznych objawów pacjenta. Uwagi dodatkowe Test ELISpot jest szczególnie przydatny w przypadkach, gdy standardowe testy serologiczne (np. ELISA, Western blot) dają wyniki niejednoznaczne.