Cel badania Test ma na celu określenie liczby limfocytów T wydzielających interferon‑γ (IFN‑γ) po stymulacji antygenem Aspergillus spp.. Dzięki temu można ocenić funkcjonalny stan komórek odpornościowych w kontekście: potencjalnej infekcji grzybiczej (np.
aspergilozę invaszną), rozpoznania i monitorowania alergicznego zapalenia oskrzeli wywołanego Aspergillus (ABPA), oceny zaburzeń immunologicznych u pacjentów z zaburzeniami neurorozwojowymi, w tym autyzmem, gdzie dysregulacja odpowiedzi komórkowej może wpływać na przebieg choroby.
Wskazania kliniczne podejrzenie wczesnej lub ukrytej aspergilozy u osób z osłabionym układem odpornościowym, monitorowanie skuteczności terapii przeciwgrzybiczej, diagnoza alergicznego zapalenia oskrzeli wywołanego Aspergillus, badanie funkcji komórek T u pacjentów z ASD, PANS/PANDAS lub innymi zaburzeniami neurorozwojowymi, u których obserwuje się nieprawidłowości immunologiczne, ocena ryzyka infekcji grzybiczych przed rozpoczęciem intensywnej immunosupresji (chemioterapia, przeszczepy, terapia biologiczna).
Metoda Test oparty jest na technice ELISpot (Enzyme‑Linked ImmunoSpot).
Procedura obejmuje: izolację monocytów i limfocytów (PBMC) z krwi pełnej pobranej do probówki z antykoagulantem CPDA, inkubację 10⁵‑2·10⁵ komórek w 96‑studzianych płytkach pokrytych przeciwciałami wychwytującymi IFN‑γ, stymulację antygenem Aspergillus (wyekstrahowanym białkiem lub całym wyciągiem), detekcję wydzielonych cytokin przy użyciu drugorzędowego przeciwciała sprzężonego enzymem, rozwoj reakcji enzymatycznej, co prowadzi do powstania widocznych plam (spotów) reprezentujących pojedyncze komórki produkujące IFN‑γ, liczenie plam przy pomocy automatycznego czytnika ELISpot i wyrażenie wyniku jako liczba spotów na 10⁵ PBMC.
Przygotowanie pacjenta Przygotowanie nie wymaga długotrwałego postu, ale zaleca się: unikanie intensywnej aktywności fizycznej oraz dużych dawek witaminy C i suplementów immunomodulujących na 24 h przed pobraniem krwi, odstawienie leków immunosupresyjnych (np.