Cel badania Badanie określa wielkość subpopulacji limfocytów T regulatorowych (Treg) oznaczonych markerami CD4 i CD25 w próbce krwi obwodowej. Wynik pozwala ocenić zdolność organizmu do hamowania nadmiernych reakcji immunologicznych, zapobiegania autoagresji oraz monitorowania stanu zapalnego. Wskazania kliniczne Rozpoznanie i kontrola chorób autoimmunologicznych, takich jak toczeń rumieniowaty układowy, choroba Hashimoto czy cukrzyca typu 1.
Ocena funkcji immunoregulacyjnej u pacjentów z zaburzeniami neurorozwojowymi, w tym autyzmem (ASD), PANS oraz PANDAS. Badanie przy podejrzeniu pierwotnego lub wtórnego niedoboru odporności, a także nadmiernej reakcji zapalnej. Monitorowanie skuteczności terapii immunomodulujących (np. glikokortykosteroidy, leki biologiczne, immunoglobuliny). Ocena ryzyka powikłań po przeszczepach, w trakcie terapii immunosupresyjnej oraz przed rozpoczęciem intensywnego leczenia onkologicznego.
Materiał biologiczny Krew obwodowa pobrana do 4 ml antykoagulantu (EDTA lub heparyna). Próbka powinna być przetworzona w ciągu 2–4 godzin od pobrania. Metoda Analiza przeprowadzana jest przy użyciu cytometrii przepływowej (flow cytometry). Próbka jest inkubowana z monoklonalnymi przeciwciałami znakowanymi fluorochromami skierowanymi przeciwko CD4 oraz CD25.
Po zmyciu niezwiązanego przeciwciała komórki są analizowane w cytofonie, co umożliwia wyznaczenie procentowego udziału komórek CD4⁺CD25⁺ wśród wszystkich limfocytów T. Dodatkowo, w niektórych protokołach, uwzględnia się marker FoxP3, aby zwiększyć specyficzność identyfikacji Treg. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnego przygotowania – pobranie krwi może odbywać się w dowolny dzień tygodnia.
Pacjenci przyjmujący leki immunosupresyjne, sterydy lub suplementy wpływające na układ odpornościowy powinni poinformować lekarza, gdyż mogą zmienić liczbę Treg. Zaleca się unikanie intensywnego wysiłku fizycznego oraz spożycia alkoholu w ciągu 24 h przed pobraniem. W przypadku badań u dzieci zaleca się pobranie krwi w warunkach minimalnego stresu, co zmniejsza wpływ czynników stresogennych na wynik.
Interpretacja wyników Wartość prawidłowa: 5‑10 % limfocytów T (wartość referencyjna może się nieco różnić w zależności od laboratorium i wieku pacjenta). Obniżony udział Treg: może wskazywać na zwiększone ryzyko autoimmunizacji, przewlekłe stany zapalne, zaburzenia immunologiczne obserwowane u niektórych osób z ASD lub PANS/PANDAS.