Cel badania Analiza immunofenotypowa subpopulacji limfocytów T (marker CD3) oraz limfocytów B (marker CD19) w krwi obwodowej. Badanie pozwala określić względny udział tych dwóch głównych grup limfocytów, co jest niezbędne do oceny stanu układu immunologicznego i identyfikacji jego zaburzeń. Wskazania kliniczne Ocena odporności przy podejrzeniu immunodysfunkcji, w tym chorób autoimmunologicznych, pierwotnych i wtórnych immunodeficyt.
Monitorowanie przebiegu chorób autoimmunologicznych oraz reakcji na leczenie immunosupresyjne. Diagnostyka i kontrola schorzeń hematologicznych, takich jak chłoniaki, białaczki limfocytowe oraz inne nowotwory układu limfatycznego. Badanie w ramach kompleksowej oceny immunologicznej u osób z zaburzeniami neurorozwojowymi (autyzm – ASD, PANS, PANDAS), gdzie nieprawidłowa proporcja limfocytów T/B może współwystępować. Ocena skuteczności terapii immunomodulujących, np.
po podaniu immunoglobulin, leków biologicznych czy antybiotykoterapii. Materiał biologiczny Krew pełna pobrana żylą – zazwyczaj 2‑5 ml – do probówki z antykoagulantem (EDTA). Próbka powinna być przetwarzana w ciągu 24 h, przechowywana w temperaturze 4‑8 °C. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnych przygotowań dietetycznych ani farmakologicznych.
Zaleca się pobranie krwi w stanie spoczynku, najlepiej rano, po uniknięciu intensywnego wysiłku fizycznego i silnego stresu w ciągu ostatnich 24 h. W przypadku pacjentów przyjmujących leki immunosupresyjne należy odnotować ich dawkowanie. Metoda Badanie przeprowadzane jest przy użyciu cytometria przepływowa (flow cytometry). Próbka jest inkubowana z monoklonalnymi przeciwciałami sprzężonymi z fluorochromami specyficznymi dla CD3 i CD19.
Po zmyciu nadmiaru przeciwciał komórki są analizowane w cytometrze, który mierzy intensywność fluorescencji, umożliwiając: Gating na limfocyty (CD45+ SSC low) oraz wykluczenie martwych komórek (7‑AAD lub propidium iodide). Rozróżnienie podpopulacji CD3+ (limfocyty T) i CD19+ (limfocyty B). Obliczenie procentowego udziału każdej subpopulacji w stosunku do ogólnej liczby limfocytów.
Interpretacja wyników Normy referencyjne (przykładowe, mogą różnić się w zależności od laboratorium): Limfocyty T (CD3+): 60‑85 % wszystkich limfocytów. Limfocyty B (CD19+): 5‑20 % wszystkich limfocytów. Wzrost odsetka CD3+ może wskazywać na aktywację układu odpornościowego w odpowiedzi na infekcję, stan zapalny lub stres immunologiczny. Obniżony udział CD3+ lub CD19+ może sugerować immunodeficytę, np.