Cel badania Analiza subpopulacji limfocytów NK (Natural Killer) w krwi obwodowej ma na celu określenie ich ogólnej liczebności oraz udziału poszczególnych podtypów, takich jak CD56brightCD16− i CD56dimCD16+. Wynik umożliwia ocenę zdolności organizmu do zwalczania infekcji wirusowych, monitorowanie nadzoru nowotworowego oraz regulacji odpowiedzi immunologicznej. Wskazania kliniczne Podejrzenie pierwotnych lub wtórnych niedoborów komórek NK – np.
w chorobach immunologicznych, po chemioterapii lub w stanach immunosupresji. Choroby autoimmunologiczne i autoinflamacyjne, w których obserwuje się zmiany w aktywacji NK. Przewlekłe zakażenia wirusowe lub bakteryjne, wymagające oceny funkcji cytotoksycznej. Ocena statusu immunologicznego u dzieci i dorosłych z ASD, PANS/PANDAS oraz innymi zaburzeniami neurorozwojowymi.
Kontrola pacjentów po przeszczepach, w trakcie immunoterapii nowotworowej oraz przy leczeniu modulującym układ odpornościowy. Materiał biologiczny Świeża krew żylna pobrana do probówki zawierającej antykoagulant EDTA (2‑3 ml). Próbka powinna być przetworzona w ciągu 4‑6 godzin od pobrania, aby zapewnić stabilność markerów powierzchniowych. Metoda Badanie przeprowadza się przy użyciu cytometrii przepływowej.
Do próbki dodaje się zestaw fluorochromowo znakowanych przeciwciał monoklonalnych, w tym: CD3 – do wykluczenia limfocytów T. CD56 – podstawowy marker komórek NK. CD16 – pozwala rozróżnić podtypy CD56bright i CD56dim. KIR (receptory immunoglobulinowe), NKG2A, CD57 – dodatkowe wskaźniki dojrzałości i aktywacji. Opcjonalnie CD94 i NKG2D – rozszerzają profil funkcjonalny NK.
Po inkubacji próbka jest przepuszczana przez cytometr przepływowy, a uzyskane dane są analizowane przy użyciu oprogramowania dedykowanego do immunofenotypizacji. Wyniki podaje się jako liczba komórek NK na mikrolitr (komórki/µl) oraz procentowy udział poszczególnych podtypów. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnych przygotowań.
Zaleca się pobranie krwi w godzinach porannych, po co najmniej 8‑godzinnym okresie postu, aby zminimalizować wpływ krótkotrwałych wahań metabolicznych na liczebność limfocytów. Pacjent powinien unikać intensywnego wysiłku fizycznego i stresu w dniu pobrania. Interpretacja wyników Zakresy referencyjne mogą się nieco różnić w zależności od laboratorium, ale ogólnie przyjmuje się: Łączna liczba komórek NK: 100‑600 komórek/µl. CD56brightCD16−: 5‑15 % całkowitej populacji NK.