Cel badania Określenie obecności i poziomu przeciwciał przeciwko białku desmogleina‑1 (Dsg1) w surowicy pacjenta. Test służy do potwierdzenia diagnozy pęcherzowych chorób autoimmunologicznych skóry oraz do oceny aktywności choroby. Wskazania kliniczne Podejrzenie lub potwierdzenie pemphigus foliaceus – najczęstszej choroby, w której przeciwciała skierowane są przeciw Dsg1. Różnicowanie pomiędzy pemphigus foliaceus a innymi pęcherzowymi dermatozami (np.
pemphigus vulgaris, dermatitis bullosa). Monitorowanie skuteczności leczenia immunosupresyjnego u pacjentów z potwierdzonymi przeciwciałami przeciw Dsg1. Ocena współistniejących chorób autoimmunologicznych u osób z zaburzeniami neurorozwojowymi (ASD, PANS/PANDAS), które wykazują podwyższoną częstość występowania autoantygenów. Materiał biologiczny Surowica pobrana z krwi obwodowej.
Próbka powinna być odwirowana i przechowywana w temperaturze –20 °C lub niższej do momentu analizy. Metoda Immunofluorescencja pośrednia (IFT) na preparacie tkankowym zawierającym desmogleinę‑1. Surowica pacjenta jest inkubowana z przygotowanym podłożem, a następnie z przeciwciałem wtórnym znakowanym fluorochromem. Obserwuje się fluorescencję pod mikroskopem fluorescencyjnym, co pozwala ocenić obecność i intensywność reakcji.
Interpretacja wyników Negatywny (brak fluorescencji) – brak wykrywalnych przeciwciał przeciw Dsg1; wyniki nie wspierają diagnozy pemphigus foliaceus. Pozytywny (fluorescencja) – wykryto przeciwciała przeciw Dsg1; wynik wspiera diagnozę pemphigus foliaceus. Intensywność fluorescencji może być oceniana semi‑kwantytatywnie (słaba, umiarkowana, silna) i służy do oceny aktywności choroby.
Wynik niejednoznaczny – słaba fluorescencja może wymagać powtórzenia testu lub dodatkowych metod (np. ELISA przeciw Dsg1) w celu potwierdzenia. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnego przygotowania. Próbka krwi może być pobrana w dowolnym momencie, niekoniecznie na czczo. Należy unikać stosowania wysokich dawek immunosupresantów w ciągu 48 h przed pobraniem, jeśli to możliwe, aby nie zafałszować wyniku.
Ograniczenia i uwagi Test wykrywa jedynie przeciwciała wiążące się z Dsg1; nie wykrywa przeciwciał przeciw Dsg3, które są charakterystyczne dla pemphigus vulgaris. Wynik może być fałszywie dodatni w przypadku innych chorób autoimmunologicznych z szerokim spektrum autoprzeciwciał. Dokładność zależy od jakości preparatu tkankowego i doświadczenia laboratorium.