Cel badania Panel diagnostyczny BLOT ma na celu identyfikację specyficznych autoanty‑ciał oraz biochemicznych wskaźników stanu zapalnego w surowicy, które są charakterystyczne dla różnych podtypów zapalenia mięśni (miózitis). Dzięki jednoczesnemu oznaczeniu wielu parametrów możliwe jest precyzyjne określenie przyczyny zapalenia, odróżnienie miózitis od innych chorób mięśniowych oraz ocena bieżącej aktywności choroby.
Wskazania kliniczne Podejrzenie zapalenia mięśni – dermatomyositis, zapalenie wielomięśniowe, zapalenie skórno‑mięśniowe, zapalenie mięśni w przebiegu zespołów overlap (np. Ocena aktualnej aktywności choroby oraz kontrola odpowiedzi na leczenie immunosupresyjne lub immunomodulujące. Rozpoznanie chorób autoimmunologicznych z objawami mięśniowymi, w tym zespołów nakładania się (overlap syndromes).
Badanie pacjentów z autyzmem (ASD), u których częściej obserwuje się dysregulację immunologiczną i autoimmunologiczne procesy zapalne. Wyjaśnienie niewyjaśnionego osłabienia mięśni, bólu mięśniowego lub podwyższonych enzymów mięśniowych (CK, aldolaza). Materiał biologiczny Surowica krwi – 5 ml pobrana z żyły po nocnym poście (minimum 8 h). Próbkę należy przechowywać w temperaturze 2‑8 °C i dostarczyć do laboratorium nie później niż 48 h od pobrania.
Przygotowanie pacjenta Pacjent powinien przyjść na badanie na czczo, unikać intensywnego wysiłku fizycznego oraz przyjmowania leków przeciwzapalnych (np. ibuprofen, naproksen) oraz kortykosteroidów w ciągu 48 h przed pobraniem krwi, o ile lekarz nie zaleci inaczej. W przypadku stałego przyjmowania leków immunosupresyjnych należy o tym poinformować lekarza prowadzącego. Metoda Analiza wykonywana jest techniką immunoblotu (BLOT).
Na wysokoczułych membranach umieszczone są wyselekcjonowane antygeny charakterystyczne dla miózitis. Po rozdzieleniu białek i inkubacji z surowicą pacjenta dochodzi do reakcji antygen‑przeciwciało. Następnie stosuje się znakowane przeciwciała wtórne i detekcję chemiluminescencyjną, co umożliwia wizualizację i ilościową ocenę obecności poszczególnych autoanty‑ciał.
Zakres badania – wykrywane markery Autoanty‑ciała przeciwko syntetazom aminokwasowym (myositis‑specific antibodies – MSA): Jo‑1, PL‑7, PL‑12, EJ, OJ. Autoanty‑ciała przeciwko białkom jądrowym i cytoplazmatycznym (myositis‑associated antibodies – MAA): Mi‑2, SRP, TIF1‑γ, MDA5, NXP‑2, HMG‑CoA reduktaza (HMGCR). Enzymy mięśniowe: kinaza kreatynowa (CK), aldolaza. Markery zapalne: białko C‑reaktywne (CRP), szybkość opadania erytrocytów (ESR), przeciwciała przeciwjądrowe (ANA).