Cel badania Badanie ma na celu wykrycie oraz ilościową ocenę tzw. P‑ciał (processing bodies) w neuronach uzyskanych z krwi obwodowej pacjenta przy zastosowaniu techniki immunofluorescencji (IFT). P‑ciała są cytoplazmatycznymi kompleksami biorącymi udział w degradacji i translacji mRNA; ich nieprawidłowa liczba może odzwierciedlać zaburzenia w regulacji RNA, które są powiązane z licznymi zaburzeniami neurorozwojowymi.
Wskazania kliniczne Diagnostyka i monitorowanie zaburzeń neurorozwojowych, w szczególności spektrum autyzmu (ICD‑10: ANEURO). Ocena ryzyka rozwoju zespołów PANS/PANDAS u osób z objawami neuropsychiatrycznymi. Badania przesiewowe u dzieci i młodzieży z niejasnymi objawami behawioralno‑neurologicznymi. Wsparcie decyzji terapeutycznych, zwłaszcza w leczeniach skierowanych na normalizację szlaków RNA.
Uzupełnienie profilu biomarkerowego w ramach wielowymiarowej oceny pacjenta z zaburzeniami neurorozwojowymi. Materiał biologiczny Krew pełna – 5‑7 ml pobrane z żyły obwodowej do probówki zawierającej antykoagulant EDTA. Z próbki izolowane są leukocyty jednokernowe, które poddaje się reprogramowaniu in vitro do komórek indukowanych neuronalnie (iNeuron). Próbka może być przechowywana w temperaturze 4 °C nie dłużej niż 24 h przed rozpoczęciem procesu reprogramowania.
Metoda Po przekształceniu leukocytów w iNeuron, komórki są utrwalane i poddawane immunofluorescencji. W badaniu wykorzystuje się monoklonalne przeciwciała skierowane przeciwko charakterystycznym markerom P‑ciał, takim jak DCP1a i GW182, które są koniugowane fluorochromem (np. Następnie przy pomocy mikroskopii konfokalnej, określanej jako Immunofluorescent Tomography (IFT), rejestruje się liczbę i rozmieszczenie P‑ciał w cytoplazmie komórek.
Zebrane obrazy analizowane są automatycznie przez specjalistyczne oprogramowanie liczące fluorescencyjne punkty, co zapewnia standaryzowaną liczbę P‑ciał na 100 komórek. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnej diety ani odstawiania leków, jednak zaleca się unikanie pobrania krwi w ciągu 24 h od intensywnego wysiłku fizycznego.
Osoby przyjmujące leki immunosupresyjne, kortykosteroidy lub inne środki modulujące układ odpornościowy powinny poinformować lekarza, gdyż mogą wpływać na liczbę obserwowanych P‑ciał. W przypadku wystąpienia infekcji wirusowej lub bakteryjnej w dniu pobrania krwi, należy rozważyć odroczenie badania.