Cel badania Badanie ma na celu identyfikację przeciwciał anty‑mitochondrialnych klasy M2 (AMA‑M2) w surowicy krwi przy użyciu techniki pośredniej immunofluorescencji (IIF). Obecność AMA‑M2 jest wysoce specyficznym markerem pierwotnej żółciowej cholangitis (PBC), ale może także występować w innych autoimmunologicznych chorobach wątroby. Wskazania kliniczne Podejrzenie PBC, zwłaszcza przy podwyższonych enzymach cholestatywnych (alkaliczna fosfataza, γ‑glutamylotransferaza).
Diagnostyka autoimmunologicznego zapalenia wątroby, w którym AMA‑M2 może być dodatnie. Ocena niejasnych podwyższeń enzymów wątrobowych po wykluczeniu przyczyn mechanicznych i metabolicznych. Włączenie do panelu autoimmunologicznego przy podejrzeniu zespołów autoimmunologicznych współistniejących z zaburzeniami neurorozwojowymi, w tym autyzmem. Monitoring pacjentów z potwierdzonym PBC w celu oceny odpowiedzi na terapię.
Materiał biologiczny Jednorazowa próbka krwi pobrana z żyły, najczęściej w probówce z żelowym koagulantem. Z próbki uzyskuje się surowicę, którą należy oddzielić w ciągu 2 h od pobrania i przechowywać w temperaturze 2‑8 °C (do 48 h) lub zamrozić w –20 °C przy dłuższym przechowywaniu. Metoda Test realizowany jest metodą pośredniej immunofluorescencji (IIF). Na szkiełko z substratem mitochondrialnym (lub komórkami hepatocytów) nakłada się surowicę pacjenta.
Następnie dodaje się wtórne przeciwciało znakowane fluorochromem, które wiąże się z ewentualnymi AMA‑M2. Poziom fluorescencji ocenia się pod mikroskopem fluorescencyjnym i klasyfikuje według skali półlogarytmicznej (negatywny, szara strefa, dodatni). Interpretacja wyników Negatywny – brak wykrywalnych AMA‑M2. Nie wyklucza wczesnego stadium PBC ani innych chorób autoimmunologicznych wątroby.
Pozytywny – obecność AMA‑M2, co silnie sugeruje PBC, zwłaszcza przy jednoczesnym podwyższeniu ALP i GGT. Wynik dodatni wymaga dalszej oceny klinicznej oraz potwierdzenia metodami bardziej czułymi (ELISA, immunoblot). Wartość nieokreślona (szara strefa) – wynik pośredni wymaga powtórzenia testu lub zastosowania technik alternatywnych, aby uniknąć fałszywie dodatnich/ujemnych rezultatów. Przygotowanie pacjenta Nie jest wymagana specjalna diety ani post przed pobraniem krwi.
Próbkę można pobrać o dowolnej porze dnia, pod warunkiem unikania intensywnego wysiłku fizycznego i dużych ilości alkoholu przed badaniem. Pacjent powinien być poinformowany o krótkotrwałym dyskomforcie związanym z nakłuciem żyły. Znaczenie w kontekście zaburzeń neurorozwojowych U niektórych osób z zaburzeniami neurorozwojowymi, w tym z autyzmem, obserwuje się podwyższony poziom przeciwciał autoimmunologicznych, w tym AMA‑M2.