Cel badania Badanie ma na celu identyfikację w surowicy przeciwciał onkoneuronalnych typu p‑Hu (znanych także jako ANNA‑1). Obecność tych immunoglobulin wskazuje na możliwość wystąpienia zespołu paraneoplastycznego układu nerwowego, najczęściej powiązanego z nowotworem drobnokomórkowym płuca, ale także z innymi nowotworami neuroendokrynnymi.
Wskazania kliniczne Neurologiczne objawy o niejasnym podłożu: encefalopatia, zapalenie mózgu, zapalenie rdzenia, neuropatia czuciowa, zespół przypominający Guillain‑Barré. U pacjentów z rozpoznanym lub podejrzewanym drobnokomórkowym rakiem płuca oraz innymi nowotworami neuroendokrynnymi (np. neuroblastoma, guz chromochłonny). Ocena przyczyn neuropsychiatrycznych zaburzeń, w których podejrzewa się autoimmunologiczne podłoże.
W kontekście zaburzeń neurorozwojowych, w tym autyzmu, gdy istnieje potrzeba wykluczenia współistniejących procesów autoimmunologicznych wpływających na funkcjonowanie ośrodkowego układu nerwowego. Materiał biologiczny Surowica pobrana z żyły – zazwyczaj 3‑5 ml krwi, odwirowana w probówce z koagulantem (tuba z koagulacją). Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnych przygotowań.
Zaleca się pobranie próbki w godzinach porannych, w miarę możliwości po krótkim poście (8‑10 h), aby zminimalizować ryzyko hemolizy i wpływu posiłku na skład surowicy. Metoda Analiza przeprowadzana jest metodą immunoblotu (Western blot). Procedura obejmuje: Rozdzielenie białek Hu (p‑Hu) w żelu poliakrylamidowym pod wpływem SDS. Transfer rozdzielonych białek na membranę nitrocelulozową.
Inkubuowanie membrany z surowicą pacjenta, co pozwala na wiązanie się specyficznych przeciwciał. Detekcję przy użyciu wtórnego przeciwciała anty‑ludzkiego sprzężonego z enzymem (np. HRP) oraz podłożem chemiluminescencyjnym. W razie potrzeby potwierdzenie wyniku metodą immunofluorescencji pośredniej (IFA) lub testem immunoprecypitacyjnym. Interpretacja wyników Pozytywny: Wyraźny sygnał na membranie potwierdzający obecność przeciwciał anty‑Hu.
Wskazuje na wysokie prawdopodobieństwo zespołu paraneoplastycznego, szczególnie przy jednoczesnym rozpoznaniu drobnokomórkowego raka płuca. Negatywny: Brak wykrywalnych przeciwciał anty‑Hu. Nie wyklucza całkowicie zespołu paraneoplastycznego, gdyż nie wszystkie przypadki wykazują serologiczną serokonswersję. Wynik niejednoznaczny / słaby sygnał: Może wymagać powtórzenia badania, analizy próbki CSF lub dodatkowych testów na inne przeciwciała onkoneuronalne.