Cel badania Badanie ma na celu identyfikację i porównanie swoistych przeciwciał klasy IgM skierowanych przeciwko antygenom Toxoplasma gondii (tzw. P‑ciała IgM) w surowicy matki oraz noworodka. Obecność IgM u dziecka jest dowodem aktywnej, wrodzonej infekcji, ponieważ przeciwciała IgM nie przechodzą przez łożysko. Wskazania kliniczne Potwierdzenie wrodzonej toksoplazmozy u noworodka, wcześniaka lub noworodka z podejrzeniem zakażenia prenatalnego.
Rozróżnienie infekcji wrodzonej od przeniesionych matczynych przeciwciał IgG. Ocena ryzyka powikłań neurologicznych, okulistycznych oraz innych uszkodzeń narządów u noworodka. Włączenie do diagnostyki etiologicznej zaburzeń neurorozwojowych, w tym spektrum autyzmu, gdy istnieje podejrzenie wpływu wrodzonej toksoplazmozy na rozwój mózgu. Uzupełnienie panelu serologicznego przy podejrzeniu innych infekcji prenatalnych (np.
Materiał biologiczny Surowica lub osocze pobrane jednorazowo od matki – najkorzystniej przed porodem lub w pierwszych 48 h po porodzie. Surowica lub osocze noworodka – pobranie w ciągu pierwszych 24‑48 h życia, z możliwością powtórzenia po 2‑3 tygodniach w celu weryfikacji wyniku. Próbki muszą być wolne od hemolizy, przechowywane w temperaturze 2‑8 °C i dostarczone do laboratorium nie później niż po 24 h od pobrania.
Metoda Analiza opiera się na technice Western blot, która pozwala na rozdzielenie i identyfikację poszczególnych antygenów T. gondii oraz wykrycie przyłączonych przeciwciał IgM. Na membranie nitrocelulozowej rozdzielono i przeniesiono oczyszczone antygeny, m.in. Po zablokowaniu niespecyficznych miejsc membrana inkubowana była z rozcieńczonymi próbkami surowicy. Do wykrycia przyłączonych IgM zastosowano enzymatycznie znakowane przeciwciało anty‑ludzkie IgM (HRP‑konjugat).
Dodanie podsubstratu spowodowało powstanie charakterystycznych pasm (bandów) odpowiadających poszczególnym antygenom, co umożliwia ocenę profilu przeciwciał. Test charakteryzuje się wysoką czułością (>95 %) i specyficznością (>98 %) w wykrywaniu wrodzonej toksoplazmozy. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnych zaleceń dietetycznych ani farmakologicznych.
Należy jedynie zapewnić pobranie próbek w warunkach aseptycznych, unikać hemolizy oraz przechowywać je w chłodzie (2‑8 °C) do momentu transportu do laboratorium. Interpretacja wyników Pozytywny wynik (obecność pasm IgM w surowicy noworodka) – dowód aktywnej, wrodzonej toksoplazmozy. Negatywny wynik (brak pasm IgM u noworodka, jedynie IgG) – brak aktywnej infekcji; obecne IgG pochodzą od matki.