Cel badania Test ma na celu identyfikację punktowych zmian w krytycznych regionach (kodony 12, 13 i 61) genu NRAS. Mutacje te prowadzą do trwałego włączenia białka NRAS i nieprawidłowego pobudzenia kaskady MAPK, co zwiększa ryzyko rozwoju nowotworów oraz może być przyczyną zespołów RASopatycznych wykazujących cechy neurorozwojowe. Wskazania kliniczne Diagnostyka nowotworów, w których mutacje NRAS pełnią rolę prognostyczną lub predykcyjną (np.
czerniak, rak płuca, rak jelita grubego). Planowanie terapii celowanej, w tym inhibitorów MEK oraz leków bezpośrednio hamujących KRAS/NRAS. Rozpoznanie i potwierdzenie zespołów RASopatycznych (np. zespół Noonan, Costello) u pacjentów z objawami neurorozwojowymi, takimi jak opóźnienia rozwojowe, zaburzenia komunikacji czy cechy spektrum autyzmu. Badania przesiewowe w rodzinach z wywiadem nowotworowym lub z historią nieprawidłowości rozwojowych.
Ocena ryzyka w kontekście terapii immunoonkologicznej, gdzie obecność mutacji NRAS może wpływać na odpowiedź na inhibitory punktu kontrolnego. Materiał biologiczny Krew pełna pobrana do probówki z dodatkiem EDTA (5‑10 ml). DNA izolowane jest z leukocytów. Wymaz z jamy ustnej (buccal swab) – alternatywa szczególnie przydatna u małych dzieci lub pacjentów, u których pobranie krwi jest trudne.
W niektórych przypadkach dopuszczalne jest użycie materiału z wycinków tkankowych utrwalonych w formalinie (FFPE), jeśli badanie dotyczy już istniejących próbek histopatologicznych. Metoda Analiza przeprowadzana jest przy użyciu jednej z dwóch technik: PCR z sekwencjonowaniem metodą Sangera – tradycyjna metoda, zapewniająca wysoką dokładność w wykrywaniu pojedynczych punktowych zmian.
Next‑generation sequencing (NGS) – umożliwia jednoczesne badanie wielu regionów i zwiększa czułość wykrywania niskoczęstotliwościowych wariantów. Obie techniki obejmują amplifikację i sekwencjonowanie wybranych eksonów kodujących krytyczne kodony (12, 13, 61). Interpretacja wyników odbywa się zgodnie z wytycznymi ACMG/AMP. Interpretacja wyników Wynik negatywny – w badanych obszarach nie stwierdzono mutacji patogennych.
Nie wyklucza to jednak obecności zmian poza zakresem testu. Wynik pozytywny – wykryto mutację, np. c.35G>A (p.Gly12Asp), c.38G>A (p.Gly13Asp) lub c.182A>G (p.Gln61Arg). Taka zmiana wskazuje na stałą aktywację szlaku MAPK i wymaga dalszej oceny onkologicznej oraz genetycznej. Warianty nieznaczące klinicznie (VUS) – zmiany o niejasnym znaczeniu, które powinny być skonsultowane z genetykiem i, w razie potrzeby, poddane dodatkowym badaniom funkcjonalnym.