Cel badania Badanie LTT – Tworzywa sztuczne (kod ICD‑10: LTT‑TWO) ma na celu określenie, czy komórki T pacjenta wykazują proliferację po zetknięciu z wyciągami z wybranych tworzyw sztucznych, takich jak polichlorek winylu (PVC), poliwęglan czy żywice epoksydowe. Test identyfikuje reakcję opóźnioną (hipersensibilizację typu IV), której patogeneza opiera się na aktywacji limfocytów T, wydzielaniu cytokin (IFN‑γ, IL‑2) i lokalnym zapaleniu.
Wskazania kliniczne Utrzymujące się lub nawracające zmiany skórne (wyprysk, zapalenie kontaktowe) po kontakcie z opakowaniami, zabawkami lub innymi przedmiotami wykonanymi z plastiku. Objawy układu oddechowego (kaszel, duszność, nasilenie astmy) nasilające się w otoczeniu zawierającym tworzywa sztuczne. Nietypowe bóle stawów, mięśni, uczucie zmęczenia lub ogólne objawy układu immunologicznego, których przyczyna nie jest wyraźna.
Problemy żołądkowo‑jelitowe (bóle brzucha, wzdęcia) mogące wynikać z reakcji immunologicznej na chemikalia z tworzyw. U osób z autyzmem (ASD), PANS/PANDAS lub innymi zaburzeniami neurorozwojowymi, u których podejrzewa się wpływ substancji takich jak bisfenol A czy ftalany na nasilenie objawów neurologicznych. Ocena potencjalnej toksyczności chemicznej w miejscu pracy lub w domu, kiedy istnieje podejrzenie, że kontakt z tworzywami sztucznymi przyczynia się do dolegliwości.
Materiał biologiczny Świeża krew pełna pobrana żylą (przeciwzakrzepowy: heparyna sodowa lub EDTA). Izolowane limfocyty T – zazwyczaj 1‑2 × 10⁶ komórek na jedną probę. Metoda Badanie wykonywane jest w warunkach in‑vitro, przy użyciu hodowli limfocytów T w pożywce RPMI‑1640 wzbogaconej o: 10 % surowicy płodowej (FBS), L‑glutaminę, Antybiotyki (penicylina/streptomycyna) zapobiegające zakażeniom.
Do kultur dodaje się standaryzowane wyciągi z wybranych tworzyw sztucznych w trzech stężeniach (0,1 µg/ml, 1 µg/ml, 10 µg/ml). Po 5‑6 dniach inkubacji ocenia się proliferację komórek: Metodą włączenia ^3H‑tymidyny lub testami kolorometrycznymi (MTT, XTT, WST‑1). Wynik wyrażany jest jako Stimulation Index (SI) – stosunek proliferacji w obecności antygenu do proliferacji w kontrolnej kulturze. Wartość SI > 2,0 uznawana jest za dodatnią, co wskazuje na istotną reakcję typu IV.
Przygotowanie pacjenta Przed pobraniem krwi pacjent powinien: Unikać leków immunosupresyjnych (kortykosteroidy, metotreksat) oraz leków przeciwhistaminowych przynajmniej 7 dni przed badaniem, o ile nie zagraża to jego zdrowiu. Powstrzymać się od spożywania alkoholu oraz intensywnego wysiłku fizycznego w ciągu 24 godzin przed pobraniem. Zgłosić wszystkie aktualne ekspozycje na tworzywa sztuczne (praca w przemyśle, używanie konkretnych produktów, kontakt z opakowaniami).