Cel badania LTT (Lymphocyte Transformation Test) – panel Borrelia służy do oceny komórkowej odpowiedzi immunologicznej na wybrane antygeny Borrelia burgdorferi. Test mierzy zdolność limfocytów T do podziału po zetknięciu z bakteryjnymi białkami, co pozwala wykryć zarówno aktualne, jak i przeszłe zakażenie boreliozą. Wskazania kliniczne Utrzymujące się objawy sugerujące boreliozę przy negatywnych lub niejasnych wynikach testów serologicznych (ELISA, Western blot).
Podejrzenie późnych stadiów choroby, takich jak neuroborrelioza, zapalenie stawów lub powikłania kardiologiczne. Ocena potencjalnego udziału Borrelia w zespołach PANS/PANDAS, gdzie infekcja może wywoływać objawy neuropsychiatryczne. Wsparcie diagnostyczne w zaburzeniach neurorozwojowych, w tym w autyzmie, gdy istnieje podejrzenie wpływu przewlekłej infekcji na funkcjonowanie układu nerwowego.
Rozważenie testu w przypadkach niejednoznacznych wyników innych metod diagnostycznych lub w sytuacji, gdy pacjent przyjmuje leki immunosupresyjne. Materiał biologiczny Do badania pobiera się 5–10 ml świeżej krwi pełnej z żyły obwodowej, najczęściej do probówki z antykoagulantem EDTA lub heparyną. Z próbki izolowane są mononukleary (PBMC) metodą gradientową (np. Ficoll‑Paque), które następnie są hodowane in vitro.
Metoda Izolacja PBMC i ich hodowla w warunkach kontrolowanych (37 °C, 5 % CO₂) przez 5–6 dni. Stymulacja komórek standaryzowanymi antygenami Borrelia – białkami flageliny, OspC, VlsE oraz ewentualnie peptydami specyficznymi dla różnych szczepów. Ocena proliferacji limfocytów przy użyciu 3H‑tiomidyny, metody fluorometrycznej (CFSE, EdU) lub oznaczenia ekspresji Ki‑67 w cytometrii przepływowej.
Obliczenie wskaźnika stymulacji (Stimulation Index, SI) jako stosunku proliferacji w warunkach z antygenem do proliferacji w kontrolach bez antygenu. Wynik podaje się jako wartość SI oraz opisuje się intensywność reakcji (niska, umiarkowana, wysoka). Przygotowanie pacjenta Badanie nie wymaga głodówki. Pacjent powinien zgłosić przyjmowanie leków immunosupresyjnych (np.
kortykosteroidy, metotreksat), leków przeciwzapalnych oraz antybiotyków (doksycyklina, amoksycylina) w ciągu ostatnich 4 tygodni, ponieważ mogą one zmniejszyć reakcję limfocytów. W razie potrzeby odstawienie preparatów powinno odbywać się po konsultacji z lekarzem prowadzącym. Interpretacja wyników SI ≥ 3,0 – wynik pozytywny, wskazujący na aktywną lub przeszłą komórkową odpowiedź immunologiczną na Borrelia.