Cel badania Test transformacji limfocytów (LTT) służy do ustalenia, czy komórki T pacjenta ulegają proliferacji po zetknięciu się z badanym lekiem w warunkach in vitro. Wynik wskazuje na obecność immunologicznie uwarunkowanej nadwrażliwości na dany preparat, co jest istotne przy planowaniu dalszego leczenia. Wskazania kliniczne Objawy sugerujące reakcję alergiczną po podaniu leku (wysypka, gorączka, zapalenie narządów).
Potrzeba oceny ryzyka ponownego podania leku, gdy nie ma alternatywy terapeutycznej. Diagnostyka nadwrażliwości lekowej u pacjentów z ASD lub innymi zaburzeniami neurorozwojowymi, którzy przyjmują wiele leków jednocześnie. Wsparcie w doborze leków przeciwbakteryjnych, przeciwpadaczkowych, niesteroidowych leków przeciwzapalnych oraz innych grup, gdy istnieje podejrzenie alergii. Uzupełnienie oceny alergologicznej przy niejednoznacznych wynikach testów skórnych lub pomiaru IgE.
Materiał biologiczny Świeża krew pełna pobrana z żyły obwodowej (zazwyczaj 5‑10 ml) do probówki zawierającej antykoagulant, najczęściej heparynę. Z próbki izolowane są mononukleary (PBMC) przy użyciu metody gradientu gęstości (np. Komórki muszą być przetworzone w ciągu 4‑6 h od pobrania, aby zachować ich żywotność. Metoda Procedura obejmuje następujące etapy: Izolację PBMC i ich hodowlę w podłożu RPMI‑1640 z dodatkiem serum (10 %).
Dodanie badanego leku w kilku stężeniach (zwykle 0,1‑10 µg/ml) oraz przygotowanie kontroli: negatywnej (bez leku) i pozytywnej (z mitogenem, np. Inkubację w warunkach 37 °C, 5 % CO₂ przez 3‑5 dni. Pomiar proliferacji limfocytów metodą włączenia radioaktywnego ^3H‑tiomidyny, metodą fluorometryczną (CFSE, EdU) lub analizą przepływową (flow cytometry). Obliczenie wskaźnika stymulacji (SI) jako stosunku proliferacji w obecności leku do proliferacji w kontrolnym medium.
W większości laboratoriów przyjmuje się, że SI > 2‑3 oznacza reakcję dodatnią, choć progi mogą być dostosowane do konkretnego leku i populacji. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnej diety ani całkowitego odstawienia leków, chyba że lekarz zaleci ich tymczasowe odstawienie w celu uniknięcia interferencji. Próbkę najlepiej pobrać w ciągu 24 h od wystąpienia objawów alergicznych, co zwiększa czułość testu.
dzieci z ASD) pobranie krwi powinno odbywać się w przyjaznym otoczeniu, z minimalnym stresem, aby zapewnić jakość materiału. Interpretacja wyników SI > 2‑3 – sugeruje dodatnią reakcję limfocytów T na badany lek, co może wskazywać na immunologiczną nadwrażliwość. SI ≤ 2 – wynik uznawany jest za negatywny; nie wyklucza jednak reakcji nieimmunologicznych (np. Wartość progowa może być zmodyfikowana w zależności od leku, stężenia użytego w teście oraz doświadczenia laboratorium.