Cel badania Badanie ma na celu identyfikację fragmentów DNA najważniejszych pasożytów i pierwotniaków obecnych w kale pacjenta. Dzięki zastosowaniu multiplexowej reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) możliwe jest wykrycie nawet bardzo niskich ilości patogenów, co jest niezbędne przy ocenie przewlekłych lub subklinicznych zakażeń jelitowych, szczególnie u osób z zaburzeniami neurorozwojowymi.
Wskazania kliniczne Objawy ze strony przewodu pokarmowego: biegunka, bóle brzuszne, wzdęcia, nudności, utrata masy ciała. Przewlekłe nietolerancje pokarmowe, zaburzenia trawienia i nieskuteczność tradycyjnych terapii dietetycznych. Rozpoznanie i kontrola zakażeń pasożytniczych u pacjentów z ASD, PANS/PANDAS oraz innymi zaburzeniami neurorozwojowymi. Ocena przyczyn przewlekłego zmęczenia, osłabienia odporności oraz zmian zachowania, które mogą mieć podłoże infekcyjne.
Monitorowanie skuteczności leczenia przeciwpasożytniczego oraz wykrywanie współzakażeń. Materiał biologiczny Świeży lub zamrożony kał – minimum 2 g, optymalnie 5 g, pobrany w sterylnych warunkach przy użyciu jednorazowych pojemników dostarczonych przez laboratorium. Przygotowanie pacjenta Próbka powinna być pobrana co najmniej 48 h po ostatnim przyjęciu antybiotyków, leków przeciwpasożytniczych lub środków przeciwzapalnych.
W dniu pobrania unikać probiotyków, suplementów zawierających prebiotyki oraz produktów fermentowanych. Przed pobraniem dokładnie umyć ręce i używać jednorazowych zestawów do pobierania kału. U małych dzieci można uzyskać materiał z pieluszek lub specjalnych zestawów do pobierania kału. Metoda Procedura obejmuje następujące etapy: Izolacja DNA z próbki kału przy użyciu techniki mechanicznego rozdrabniania (bead‑beating) oraz chemicznego liza komórek.
Multiplexowa reakcja PCR z zestawem primerów specyficznych dla ośmiu organizmów: Taenia solium – tasiemiec uzbrojony Taenia trichura – tasiemiec uzbrojony Giardia lamblia – pierwotniak Hymenolepis spp.
– tasiemce z rodzaju Hymenolepis Ascaris lumbricoides hominis – owsik ludzki Dientamoeba fragilis – pierwotniak Blastocystis hominis – pierwotniak Entamoeba histolytica – ameba wątrobowa Amplifikacja specyficznych fragmentów genetycznych, a następnie detekcja produktów PCR przy użyciu real‑time PCR (pomiar Ct) lub tradycyjnej elektroforezy.