Cel badania Badanie ma na celu identyfikację w surowicy przeciwciał klasy IgA oraz IgG skierowanych przeciwko wyselekcjonowanym antygenom Helicobacter pylori przy użyciu techniki Western Blot. Analiza obu klas immunoglobulin umożliwia określenie, czy pacjent miał kontakt z bakterią w przeszłości (IgG) oraz czy zachodzi aktywna odpowiedź immunologiczna na błonę śluzową żołądka (IgA).
Wskazania kliniczne objawy dyspeptyczne, zgaga, ból w nadbrzuszu, nudności; diagnozowanie lub wykluczenie wrzodów żołądka i dwunastnicy; monitorowanie skuteczności terapii eradykacyjnej po zakończeniu kuracji antybiotykowej; niejednoznaczne wyniki innych testów serologicznych (np.
ELISA) lub testu oddechowego z ureazą; pacjenci z zaburzeniami immunologicznymi, w których istotna jest ocena obu klas przeciwciał; osoby z zaburzeniami neurorozwojowymi, w tym autyzmem (ASD), u których zakażenie H. pylori może wpływać na mikroflorę jelitową i nasilać objawy neurobehawioralne. Materiał biologiczny surowica lub osocze pobrane z żyły w ilości ok. 5 ml krwi; pobranie powinno odbywać się w warunkach aseptycznych.
Metoda Western Blot polega na rozdzieleniu elektroforetycznym białek H. pylori, przeniesieniu ich na membranę nitrocelulozową oraz inkubacji z próbką surowicy pacjenta. Następnie stosuje się znakowane przeciwciała anty‑ludzkie (przeciw IgA i IgG), które wykrywają przyłączone przeciwciała pacjenta. Wynik prezentowany jest jako charakterystyczny wzorzec pasm odpowiadających poszczególnym antygenom bakterii (np.
Przygotowanie pacjenta brak wymogu postu przed pobraniem krwi; należy unikać przyjmowania antybiotyków, inhibitorów pompy protonowej (PPI), antagonistów receptora H2 oraz niesteroidowych leków przeciwzapalnych przez minimum 14 dni przed pobraniem próbki; jeśli pacjent otrzymał szczepionkę przeciw H.
pylori, należy odczekać co najmniej 4 tygodnie przed pobraniem krwi; po pobraniu krwi próbka powinna być niezwłocznie odwirowana, a surowica zamrożona w temperaturze –20 °C do momentu analizy. Interpretacja wyników IgG dodatnie, IgA ujemne – wskazuje na przeszłą ekspozycję na H. IgA dodatnie (z lub bez IgG) – sugeruje aktualną lub niedawno przebyta infekcję, ponieważ IgA jest wytwarzana w odpowiedzi na kontakt z błoną śluzową żołądka.