Cel badania Badanie ma na celu wykrycie czterech najczęściej występujących mutacji patogennych w genie BRCA1 (c.181T>G, c.4035delA, c.5266dupC oraz c.68_69delAG) wśród osób pochodzenia polskiego. Wynik pozwala określić nosicielstwo zwiększające ryzyko rozwoju dziedzicznego zespołu raka piersi i jajnika (HBOC). Wskazania kliniczne Rodzinny wywiad onkologiczny – nowotwory piersi lub jajnika w pierwszym stopniu pokrewieństwa.
Wczesny wiek zachorowania na raka piersi lub jajnika u pacjenta lub bliskiego krewnego. Obecność kilku przypadków nowotworów piersi/owocowych w jednej rodzinie. Planowanie ciąży, rozważanie profilaktycznych zabiegów chirurgicznych (mastektomia, owariektomia) lub intensywnej obserwacji onkologicznej. Pacjenci z podejrzeniem zespołu nowotworowego o podłożu genetycznym, w tym osoby z ASD, u których podwyższone jest ryzyko współistniejących zaburzeń genetycznych.
Materiał biologiczny Krew pełna pobrana do probówki z antykoagulantem EDTA (ok. Alternatywnie: wymaz z jamy ustnej (buccal swab) w sytuacji, gdy pobranie krwi jest niemożliwe. Metoda Analiza przeprowadzana jest przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) połączonej z metodą RFLP oraz sekwencjonowaniem Sanger’a ukierunkowanym na wybrane fragmenty DNA. Szczegółowo: c.181T>G (p.Cys61Gly) – punktowa zamiana jednego nukleotydu.
c.4035delA – delecja jednej adeniny, powodująca zmianę ramki odczytu. c.5266dupC (5382insC) – duplikacja cytozyny, prowadząca do przesunięcia ramki i przedwczesnego zakończenia translacji. c.68_69delAG (185delAG) – delecja dwóch nukleotydów w eksonie 2, skutkująca nieprawidłowym białkiem. Po amplifikacji wybranych regionów DNA następuje ich sekwencjonowanie i porównanie z sekwencją referencyjną. Wynik podawany jest jako „mutacja wykryta” lub „mutacja nieobecna”.
Przygotowanie pacjenta Przed pobraniem krwi nie wymaga się specjalnych zaleceń dietetycznych ani odstawiania leków. W przypadku wymazu z jamy ustnej pacjent powinien powstrzymać się od jedzenia, picia oraz palenia papierosów przez minimum 30 min przed pobraniem materiału. Ograniczenia i dalsza diagnostyka Negatywny wynik nie wyklucza obecności innych patogennych wariantów w genie BRCA1, w genach BRCA2, PALB2 oraz innych genach związanych z HBOC.
W silnym wywiadzie rodzinnym, mimo braku wykrytych mutacji, zaleca się rozszerzone badanie panelowe lub pełne sekwencjonowanie całego genu BRCA1/BRCA2. Interpretacja wyników Mutacja wykryta – potwierdzenie nosicielstwa jednej z badanych mutacji BRCA1. Pacjent powinien zostać skierowany do konsultacji genetycznej oraz rozważyć intensywną kontrolę onkologiczną i ewentualne środki profilaktyczne. Mutacja nieobecna – nie stwierdzono badanych wariantów.