Cel badania Badanie ma na celu określenie, który wariant – 4G czy 5G – występuje w genie PAI‑1 (SERPINE1). Analiza tego polimorfizmu pozwala oszacować predyspozycję do podwyższonej aktywności układu fibrynolitycznego, co jest istotnym czynnikiem ryzyka zarówno zakrzepicy, jak i powtarzających się poronień. Wskazania kliniczne Co najmniej dwa nieudane ciążowe zakończenia o nieustalonej przyczynie (ICD‑10: O03‑O07).
Utrzymana historia zakrzepicy żył głębokich, zatorowo‑płucnej lub zakrzepicy tętniczej. Obciążenie rodzinne trombofilią lub niepłodnością związaną z zaburzeniami krzepnięcia. Rozpoznany zespół antyfosfolipidowy, kiedy potrzebna jest dodatkowa ocena ryzyka zakrzepowego. Badania przesiewowe u osób z zaburzeniami neurorozwojowymi, w tym autyzmem, u których obserwuje się podwyższoną częstość mutacji trombofilnych.
Materiał biologiczny DNA izolowane z 5 ml krwi pełnej pobranej do probówki z antykoagulantem EDTA. Metoda Analiza przeprowadzana jest przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) z primerami selektywnymi dla alleli 4G i 5G. Po amplifikacji fragmenty DNA poddawane są jednej z następujących technik: Elektroforeza kapilarna, umożliwiająca rozdzielenie produktów PCR według wielkości. Sequencjonowanie metodą Sangera w celu potwierdzenia sekwencji.
Wynik podawany jest jako genotyp: 4G/4G – najwyższy poziom ekspresji PAI‑1, znacznie zwiększone ryzyko hiperkoagulacji. 4G/5G – umiarkowane podniesienie ekspresji, podwyższone ryzyko, ale mniej wyraźne niż w homozygotach 4G. 5G/5G – ekspresja na poziomie populacyjnym, ryzyko zbliżone do średniej. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnych zaleceń dietetycznych ani odstawiania leków. Pobranie krwi odbywa się w warunkach ambulatoryjnych.
Zaleca się unikanie intensywnego wysiłku fizycznego w dniu pobrania, choć nie wpływa on na jakość DNA. Interpretacja wyników Interpretacja opiera się na zidentyfikowanym genotypie i powinna być połączona z pełnym wywiadem klinicznym oraz innymi badaniami laboratoryjnymi, takimi jak: pomiar stężenia PAI‑1 w osoczu, standardowe testy koagulacyjne (np. PT, aPTT, D‑dimer), analiza dodatkowych genów trombofilnych (czynnik V Leiden, mutacja protrombiny).
Genotyp 4G/4G sugeruje silną predyspozycję do zakrzepicy i może tłumaczyć nawracające poronienia. Wariant 4G/5G wskazuje na umiarkowane zwiększenie ryzyka, a decyzję o dalszej profilaktyce podejmuje lekarz, biorąc pod uwagę inne czynniki ryzyka. Genotyp 5G/5G nie wyklucza innych przyczyn trombofilii, dlatego w razie potrzeby zaleca się dalsze badania.