Cel badania Badanie ma na celu identyfikację materiału genetycznego (DNA) patogenu Borrelia burgdorferi w wybranym materiale biologicznym przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR). Dzięki wysokiej czułości metody możliwe jest potwierdzenie trwającego zakażenia, zwłaszcza w sytuacjach, gdy objawy kliniczne są niespecyficzne lub wyniki serologiczne są niejednoznaczne.
Wskazania kliniczne Podejrzenie boreliozy w początkowej fazie (rumień wędrujący, gorączka, bóle stawów, objawy grypopodobne). Objawy neurologiczne sugerujące neuroboreliozę – zapalenie opon mózgowo‑rdzeniowych, zapalenie nerwów czaszkowych, neuropatia obwodowa. Artretyzm boreliozowy, zwłaszcza zapalenie dużych stawów, np. Przewlekłe dolegliwości po leczeniu boreliozy (zespół po boreliozowy, PLS).
Ocena współistniejących infekcji u pacjentów z ASD, PANS/PANDAS, gdzie zakażenie B. burgdorferi może nasilać objawy neuropsychiatryczne. Rozpoznanie boreliozy w kontekście różnicowania przyczyn objawów neurologicznych u dzieci i dorosłych. Materiał biologiczny Krew żylna – 5‑10 ml pobrane do probówki z antykoagulantem (EDTA). Płyn mózgowo‑rdzeniowy – 2‑3 ml uzyskane w warunkach sterylności.
Biopsja skóry, płyn synovialny lub inne materiały mogą być użyte po konsultacji z laboratorium. Próbki powinny być transportowane w temperaturze 2‑8 °C i dostarczone do laboratorium nie później niż 24 h od pobrania. Metoda Analiza opiera się na reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) z zestandaryzowanymi primerami skierowanymi przeciwko konserwatywnemu fragmentowi genu flagelliny (flaB) lub innemu stabilnemu regionowi genomu B.
Procedura obejmuje: Izolację wysokiej jakości DNA z pobranego materiału przy użyciu metod chemicznych lub magnetycznych. Amplifikację docelowego odcinka DNA w cyklach termicznych (denaturacja, annealing, elongacja). Detekcję produktu PCR – opcjonalnie jako PCR tradycyjne z wizualizacją w żelu agarozowym lub jako PCR w czasie rzeczywistym (qPCR) z sygnałem fluorescencyjnym.
Włączenie kontroli wewnętrznych (dodatnich i ujemnych) oraz testu na obecność inhibitorów PCR, co zapewnia wiarygodność wyniku. Raportowanie wyniku jako dodatni, ujemny lub nieprawidłowy (np. Przygotowanie pacjenta Przed pobraniem krwi zaleca się: Unikanie intensywnego wysiłku fizycznego oraz spożycia alkoholu w ciągu 24 h przed badaniem. Jeżeli to możliwe, odstawienie antybiotyków (np. doksycykliny, amoksycyliny) na co najmniej 48 h, gdyż mogą obniżać czułość testu.