Cel badania Badanie ma na celu wykrycie zarówno mutacji somatycznych, jak i germinalnych w genie PIK3CA (kod enzymu: fosfatydyloinozytol‑4,5‑bisfosforanowa kinaza katalityczna podjednostka alfa). Zmiany w tym genie prowadzą do nadmiernej aktywacji szlaku PI3K/AKT/mTOR, co może wywoływać niekontrolowany wzrost komórek, rozrost tkanek oraz zwiększać podatność na rozwój nowotworów.
Wskazania kliniczne Podejrzenie zespołu nadmiernego rozrostu związanego z mutacjami PIK3CA (PROS) – objawy takie jak makrocefalia, naczyniowe malformacje, asymetryczny rozrost kończyn. Diagnostyka nowotworów, w których mutacje PIK3CA występują najczęściej (rak piersi, rak jelita grubego, rak endometrium, czerniak, nowotwory trzustki).
Ocena przyczyn zaburzeń neurorozwojowych, w tym spektrum autyzmu, zwłaszcza gdy obserwuje się współwystępowanie z nieprawidłowościami szlaku PI3K/AKT/mTOR. Ustalenie kwalifikacji pacjenta do terapii celowanych inhibitorami PI3K lub mTOR w ramach medycyny spersonalizowanej. Rozpoznanie przyrodzonych przyczyn nadmiernego rozrostu u noworodków i małych dzieci. Materiał biologiczny Krew pełna pobrana do probówki z EDTA – służy do izolacji DNA z leukocytów.
Ślina – alternatywne źródło DNA, szczególnie przy badaniu mutacji germinalnych, gdy pobranie krwi jest utrudnione. Próbka tkankowa (biopsja, wycinek chirurgiczny) – wskazana przy podejrzeniu nowotworu lub lokalnego nadmiernego rozrostu.
Metoda Analiza przeprowadzana jest przy użyciu najnowocześniejszych technik: NGS (sekwencjonowanie następnej generacji) – umożliwia jednoczesne wykrycie punktowych zmian, małych insercji i delecji w kluczowych regionach egzonów 9 i 20, gdzie najczęściej występują patogenne mutacje. PCR z późniejszą sekwencją Sanger – stosowany w przypadku ograniczonej ilości materiału lub potrzeby potwierdzenia wyniku NGS.
Obie metody zapewniają czułość na poziomie 1‑2 % mutacji w mieszaninie komórek. Przygotowanie pacjenta Nie wymaga specjalnych przygotowań. Przy pobieraniu krwi zaleca się unikanie intensywnego wysiłku fizycznego oraz spożycia alkoholu w ciągu 24 godzin przed pobraniem, aby ograniczyć ryzyko hemolizy i zanieczyszczenia próbki.